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 引言 奧硝唑是繼甲硝唑、替硝唑后第三代硝基咪唑類的 抗厭氧菌及抗原蟲藥物。其療效高，不良反應(yīng)小，療程短，使 其在臨床上深受醫(yī)生和患者的厚愛 [1]。2015版藥典中推薦 使用液相色譜法來分析本品 [2]，但相對來說紫外分光光 度法儀器設(shè)備要求簡單，檢測時(shí)間快捷，該法是否可以作為 本品基層藥物監(jiān)測的備選方法值得考察。本文由此出發(fā)，對 比分析液相及紫外分光光度法測定奧硝唑含量。

1   儀器與試藥 安捷倫 1200 液相色譜儀；島津 UV-2600 型紫外分 光光度計(jì)；梅特勒 - 托利多 XP204 和 XPE205 電子分析天平。 奧硝唑?qū)φ掌罚ㄙ徸灾袊称匪幤窓z定研究院，批號 100608201102，含量：100%）。水為超純水，甲醇為色譜純，其他試 劑均為分析純。奧硝唑片（ 規(guī)格 0.25g，批號 160404、160801、160910）。

2   實(shí)驗(yàn)方法

2.1   液相色譜法

2.1.1   色譜條件 [2] 色 譜 柱 選 擇 Agilent Eclipse C18 (4.6×250mm,5μm)， 流動(dòng)相為甲醇 - 水（20:80），流速為 1.0mL/min，檢測波長為 318nm，柱溫為 25℃，進(jìn)樣量 10μl。

2.1.2   供試品溶液的制備 取供試品 20 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（相當(dāng)于 奧硝唑 50mg），置于 100mL 容量瓶中，加流動(dòng)相振搖使奧硝 唑溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液 2mL，置 50mL 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.1.3   對照品溶液的制備 精密稱取奧硝唑?qū)φ掌?10.35mg 于 100mL 容量瓶中，用 流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.1.4   線性關(guān)系考察 分別精密移取“

2.1.3”項(xiàng)下對照品溶液 0.5mL、1.0mL、 2.0mL、5.0mL、10.0mL 于 20mL 容量瓶中，使用流動(dòng)相稀釋至 刻度，搖勻，得到系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件 進(jìn)行測定，以濃度 X 為橫坐標(biāo)，峰面積 Y 為縱坐標(biāo)，得回歸方 程為 Y=14.895X+1.9243，r=0.9998（n=6），結(jié)果表明奧硝唑濃 度在 2.59μg·mL -1~51.75μg·mL -1 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.1.5   精密度試驗(yàn) 選擇“2.1.3”項(xiàng)奧硝唑?qū)φ掌啡芤海貜?fù)進(jìn)樣 6 次，分別測定峰面積，奧硝唑峰面積的 RSD=0.84%(n=6)，表明本儀器 精密度良好。

2.1.6   重復(fù)性試驗(yàn) 選擇同一批號樣品（批號 160404），按“2.1.2”項(xiàng)平行 制備6 份供試品溶液，分別測定含量，結(jié)果奧硝唑含量的 RSD=0.68%（n=6），表明該含量測定方法具有較好的重復(fù)性。

2.1.7   穩(wěn)定性試驗(yàn) 選擇同一供試品溶液，分別于 0h、2h、4h、6h、8h 進(jìn)樣，考 察其穩(wěn)定性，結(jié)果奧硝唑峰面積的 RSD 為 1.3%（n=5），表明 供試品溶液在 8h 內(nèi)較為穩(wěn)定。

2.1.8   回收率試驗(yàn) 分別取奧硝唑?qū)φ掌?20mg、25mg、30mg 各三份，精密稱 定，加入空白輔料混合均勻，置 100mL 容量瓶中，用流動(dòng)相溶 解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取 5mL，置 50mL 容量瓶 中，加流動(dòng)相至刻度。照“2.1.1”項(xiàng)色譜條件測定峰面積，按 外標(biāo)法計(jì)算回收率，結(jié)果見表 1。

2.2   紫外分光光度法

2.2.1   檢測波長的選擇 取奧硝唑?qū)φ掌愤m量，精密稱定，用乙醇溶解并稀釋成 每 1mL 中含 10ug 的溶液，在 210~340nm 的波長范圍內(nèi)進(jìn)行 掃描，奧硝唑在 312nm 的波長處有大吸收，確定本品采用 紫外分光光度法測定含量時(shí)的檢測波長為 312nm。

2.2.2   供試品溶液的制備： 參考文獻(xiàn)[3]，取供試品 20 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱 取適量（相當(dāng)于奧硝唑 100mg），置 100mL 容量瓶中，加乙醇 75mL，振搖使奧硝唑溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精 密量取續(xù)濾液 1mL，置另一 100mL 量瓶中，加乙醇稀釋至刻 度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3   標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍考察 精密稱取奧硝唑?qū)φ掌?10.38mg，置 100mL 量瓶中，2.3   藥品的發(fā)放管理 。

2.3.1   藥品儲備間負(fù)責(zé)人根據(jù)手術(shù)間用藥基數(shù)補(bǔ)充手術(shù)間藥 柜，急救車的用藥，記錄藥品發(fā)放名稱，種類，劑量，時(shí)間。

2.3.2   夜間備用一定基數(shù)的毒麻、精神藥品，專柜加鎖，由 值班麻醉生和藥品儲備間負(fù)責(zé)人共同清點(diǎn)、簽名并上鎖， 第二天共同清點(diǎn)基數(shù)交接并記錄。

2.3.3   發(fā)放藥品時(shí)嚴(yán)格按照藥品先期先發(fā)先用，既能符合手 術(shù)需求，又能加快藥品的更新?lián)Q代，保證手術(shù)用藥的安全 性和醫(yī)療質(zhì)量。

2.4   藥品的核查管理

2.4.1   藥品質(zhì)控監(jiān)察 手術(shù)室應(yīng)有對整個(gè)科室藥品儲存和使用的監(jiān)察制度，由 科主任、護(hù)士長及有豐富經(jīng)驗(yàn)的高年資醫(yī)護(hù)人員成立藥品管 理監(jiān)查指導(dǎo)小組，主要負(fù)責(zé)對藥品的安全擺放及安全使用的 監(jiān)督和檢查 [2]，每月檢查。

2.4.2   嚴(yán)格執(zhí)行查對制度 “三查五對”，三查既備藥時(shí)查、給藥時(shí)查、給藥后查，五對既核對藥品名稱、劑量、濃度、保質(zhì)期和用途。手術(shù)中給藥 執(zhí)行口頭醫(yī)囑，護(hù)士執(zhí)行時(shí)必須與下醫(yī)囑的醫(yī)生再次核實(shí)， 口述一遍無誤后方可給藥。

2.4.3   定期檢查 藥品儲備間管理人員負(fù)責(zé)藥品質(zhì)量檢查及藥品整理工 作，每周對手術(shù)室藥品全面檢查，各藥品按照先期先用的原 則擺放，并及時(shí)將過期、變質(zhì)、損壞的藥品清理出藥品間。

用乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 1.0mL、2.0mL、 4.0mL、6.0mL、8.0mL、10.0mL，分別置 20mL 容量瓶中，用乙 醇稀釋至刻度，搖勻，得到系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照“2.2.1”項(xiàng)下 條件測定吸光度，并以吸光度（Y）對其濃度（X）進(jìn)行線性回 歸，得到線性方程為 Y=0.035X-0.003，r=0.9999（n=6），結(jié)果 表明奧硝唑濃度在2.08μg·mL -1~20.76μg·mL -1 范圍內(nèi)與吸 光度存在較好線性關(guān)系。

2.2.4   精密度試驗(yàn) 取“2.2.3”項(xiàng)濃度高的對照品溶液，重復(fù)測定 6 次吸 光度，RSD=0.84%(n=6)，表明本儀器精密度良好。

2.2.5   重復(fù)性試驗(yàn) 取 同 一 批 號 樣 品（批 號 160404），按“2.2.2”項(xiàng) 平 行 制備6 份供試品溶液，分別測定含量，結(jié)果奧硝唑含量的 RSD=0.68%(n=6)，表明本含量測定方法重復(fù)性較好。

2.2.6   穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批號樣品（批號 160404），按“2.2.2”項(xiàng)制備供試 品溶液，分別于 0h、2h、4h、6h、8h 進(jìn)樣，記錄吸光度，結(jié)果吸光 度的 RSD 為 0.92%（n=5），表明溶液在 8h 內(nèi)有良好的穩(wěn)定性。 2.1.8   回收率試驗(yàn) 分別稱取奧硝唑?qū)φ掌?20mg、25mg、30mg 各三份，精密稱 定，加入空白輔料混合均勻，置 100mL 容量瓶中，加乙醇 75mL， 振搖使奧硝唑溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取 續(xù)濾液 2mL，置另一 50mL 量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，作 為供試品溶液。同法測定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率。

 討論

通過本文結(jié)果可見，液相色譜法奧硝唑含量低于紫 外分光光度法（P<0.05），考慮到液相色譜法通過色譜柱 的分離作用，將奧硝唑制備過程中的有關(guān)物質(zhì)、雜質(zhì)等干擾 分離，而紫外分光光度采用直接測定方式，故液相法測 定結(jié)果相對更為準(zhǔn)確。綜上所述，液相色譜法及紫外分 光光度法測定奧硝唑含量的方法在線性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn) 定性、回收率試驗(yàn)均符合要求，但液相色譜法分離效果 好，線性范圍更寬，建議考慮此種方式來測定奧硝唑片中奧 硝唑含量。